專利名稱：一種中藥復(fù)方提取物及含有所述活性成分的化妝品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取復(fù)合物一“十源白方”及含有所述“十源白方”作為活 性成分的化妝品
背景技術(shù)：
人類皮膚的顏色受色素體系的影響，其中包括血管中的紅色血紅蛋白，皮下脂肪 的黃色類胡蘿卜素以及主要決定皮膚顏色的黑色素的影響，這些色素的含量與分布狀況是 決定皮膚顏色的主要因素。黑色皮膚中黑色素含量較大，黑色素顆粒也較大，并且單獨(dú)分散 于整個(gè)表皮，而白色皮膚中黑色素含量低，黑色素顆粒較小呈圓形，并傾向于聚集在一起。 除了結(jié)構(gòu)性內(nèi)在因素外，環(huán)境也會(huì)對(duì)皮膚的膚色有影響，如暴露于日光或受激素作用可增 加色素的沉淀。中國人的皮膚大都屬于黃種類型，介于黑色與白色之間，自古以來中國女性 的審美觀即以白為美，就有“一白遮百丑”的說法。正是消費(fèi)者對(duì)美白皮膚的追求，使美白 祛斑類化妝品成為中國乃至亞洲化妝品的主要趨勢之一。皮膚增白功能成分有(1)汞的 化合物；(2)對(duì)苯二酚；(3)氫醌；(4)曲酸；(5)熊果苷；(6) VC及衍生物；(7)天然植物提取 物。其中1 3由于其毒性僅可在皮膚藥膏中使用，不能在化妝品中使用。(4)和(5)隨著 對(duì)其安全性質(zhì)疑報(bào)道越來越多，在化妝品中的使用越來越少，VC及衍生物的穩(wěn)定性差也限 制了其運(yùn)用。天然植物提取物則是美白功能性成分發(fā)展的趨勢之一。中藥是中國文化的寶 庫之一，其中的一些古方經(jīng)過千百年的實(shí)踐的驗(yàn)證被證明是安全有效的。十源白方是由《御藥院方》所載的“七白膏”化載而來，方中含桑白皮、冬瓜籽、白 蒺藜、檀香、白菊花、白果、白芍、白及、白茯苓、白術(shù)和生甘草；并經(jīng)過特別的提取工藝制得。組方原理冬瓜籽又名冬瓜仁，功能澤肌膚，《神農(nóng)本草經(jīng) 上經(jīng)》云其“令人悅澤， 好顏色”，《備急千金要方 七竅病 面藥第九》之五香散、洗面藥、玉屑面膏、面脂等外用方 中，均有冬瓜仁，《御藥院方》中用本品洗面增白，故該方選此作君藥。檀香通調(diào)氣機(jī)，流動(dòng) 氣血，健膚增白。清代《續(xù)名醫(yī)類案 卷十六 面》記載用檀香燃煙熏面美容的醫(yī)案“孫兆
治樊樓店家劉三，一日滿面皆黑色......孫診之曰，非病也，乃為臭氣所熏，穢氣畜于面部
不散。......廁臭氣不可聞，隱忍良久下廁，明日遂有此疾。孫曰去臭無過香，我家有南
人將至售香，可用沈檀二香各一兩，碎擘焚于爐中，安帳內(nèi)以熏絹被，蓋定，勿令香氣散，可 端坐香邊，瞑目靜坐，候香氣散方可出帳，明日引鑒照之。劉依其言，面色漸變，旬日如故”。 隱忍臭氣，氣血不通，故肌膚變黑，吸入檀香煙霧，能流通氣血，血脈通暢，則面色轉(zhuǎn)佳，容貌 可以改觀。若將檀香外用面部，常嗅其香氣，自然有助于白膚容顏的悅澤。白果生品外用治 療痤瘡。白及質(zhì)粘，《本草從新》謂之“除面上軒皰，涂手足皴裂，令人肌滑”，并謂除“軒，面 黑氣”，是知白及外用能潤白肌膚。檀香、白果、白及皆可協(xié)助君藥美白皮膚，用作臣藥。白 茯苓利水滲濕，腎主水，腎色黑，本品除腎邪可以防治肌膚變黑，外用能美膚增白，《備急千 金要方 七竅病 面藥第九》用此一味與蜂蜜調(diào)和外用，治療面軒。脾色黃，白術(shù)入脾經(jīng)，除 濕邪，其健脾除濕，有益于防止肌膚發(fā)黃，亦潔面之效藥，用醋浸泡外用，可以祛斑澤膚。肝 色青，白芍、白蒺藜、白菊花平肝抑陽，可防止肌膚變青，外用祛疵美白。白芍酸寒，益陰養(yǎng)血，陰血生則虛火降，心為火臟，其色赤，故本品降虛火，可避免皮膚變赤。桑白皮內(nèi)服清熱 利水消腫，古人常將其作為縫合線使用，且無需拆線，知其有保健肌膚之用，該方用此，既取 其清熱之力，防止肌膚發(fā)生瘡癤，又取其健膚之功，防止瘡癤遺留疤痕。茯苓、白術(shù)、白芍、白 蒺藜、白菊花、桑白皮共為佐藥。甘草調(diào)和藥性為使藥。全方十種“白藥”外用，以其自身之 白，白人之肌膚，故有去軒增白之功，可用作專意美白之品。配伍特色(1)白藥白肌膚，并可防止皮膚色澤他變，防治皮膚瘡瘍，使肌膚既白 又康。(2)五臟兼調(diào)，理肺氣為主。冬瓜仁、白及、檀香、桑白皮、白菊花、白果等皆走肺經(jīng)，肺 氣通調(diào)，氣機(jī)和利，肌膚健白。平衡理念局部與整體并調(diào)。理肺氣為主，調(diào)五臟為輔，五臟和調(diào)，各得所宜，氣從 以順，病安從來。因此，本發(fā)明的一個(gè)主題為，一種由包含冬瓜籽，白蒺藜，桑白皮，檀香，白菊花，白 果，白芍，白及，白茯苓，白術(shù)和生甘草為原料的中草藥提取復(fù)合物。本發(fā)明的一個(gè)目的是提供以特殊工藝從特定的中草藥中提取的安全性高的有效 成份作為中藥提取復(fù)合物，所述復(fù)合物具有美白角蛋白物質(zhì)的功效，因此本發(fā)明的另一個(gè) 目的是提供含有前述中藥提取復(fù)合物的化妝品，該化妝品具有美白角蛋白特別是皮膚的效 果。本發(fā)明的另外一個(gè)主題還包括中藥提取復(fù)合物在制備美白、祛斑化妝品中的應(yīng)用。因此本發(fā)明還包括一種化妝品組合物，其特征在于含有前述的中藥提取復(fù)合物， 其中藥提取復(fù)合物為1_20%，基于化妝品組合物的總重量。根據(jù)化妝品的使用部位和功能的不同要求，本申請的含有中藥提取復(fù)合物的化妝 品組合物，可以為潔面乳、護(hù)膚水、護(hù)膚乳液、護(hù)膚霜、護(hù)膚精華液、護(hù)手霜、沐浴露的形式。 根據(jù)外觀的不同需求，本發(fā)明的化妝品組合物可以是膏霜、乳液、水劑、洗劑、凝膠等形式。因此本發(fā)明的化妝品組合物含可以含有其他的有益成分，所述的有益成分選自 抗氧化劑、防腐齊IJ、芳香劑、中和劑、潤膚劑、增稠齊IJ、乳化齊IJ、表面活性齊IJ、保濕齊IJ、維生素和 遮蔽劑，以及它們的混合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了得到上述目的具有美白功能的中草藥提取復(fù)合物，通過下列構(gòu)思來實(shí) 施本發(fā)明所述中草藥提取復(fù)合物由包含冬瓜籽，白蒺藜，桑白皮，檀香，白菊 花，白果，白芍，白及，白術(shù)，白茯苓，生甘草的中草藥制備而成，各成分重量百分比為 21. 09-25. 78 %,4. 22-5. 16 %,8. 44-10. 03 %,4. 22-5. 16% A. 22-5. 16 %,8. 44-10. 03 %、 8. 44-10. 03%,4. 22-5. 16%U4. 06-17. 19%,8. 44-10. 03%,4. 22-5. 16%。根據(jù)上述中藥本身的物質(zhì)特點(diǎn)和該中藥復(fù)合物的作用，本發(fā)明的中藥提取復(fù)合物 通過特定的制備方法獲得1、將檀香和白術(shù)粉碎后，放置到揮發(fā)油提取器中，加5-15倍重量的水置電熱套中 緩緩加熱至沸騰，保持5小時(shí)，停止加熱放置片刻，收集揮發(fā)油(1)。2、將白茯苓和冬瓜籽粉碎，用5-15倍重量的水提取三次，第一次用2-4小時(shí)，第二 次1. 5-3小時(shí)，第三次1小時(shí)，合并提取液，過濾經(jīng)D101大孔樹脂上樣后，用30-70wt %乙醇 洗脫，合并洗脫液，60-80°C下真空干燥，蒸干，得到有效成分(2)。
3、桑白皮、白芍、白及、白蒺藜、白菊花、白果、生甘草粉碎，用50_90wt%乙醇提取 三次。第一次用7-15倍重量的溶媒提取2-4小時(shí)，第二次用7-15倍重量的溶媒提取1. 5-3 小時(shí)，第三次用7-15倍重量的溶媒提取1-2小時(shí)。合并提取液，回收乙醇，濃縮、過濾、水分 散，經(jīng)D101大孔樹脂用水洗脫后，收集15-70wt%乙醇洗脫液，60-80°C下真空干燥、蒸干， 得到有效成份(3)。4、取適量揮發(fā)油⑴、有效成份⑵及有效成分(3)，按1 50 1 300的比例 (按重量)溶于丙二醇的水溶液中(丙二醇水=1 7-5 7(重量比))，得到棕色透明 至半透明液體，即本發(fā)明所述的中藥復(fù)方“十源白方”提取物。本發(fā)明的中藥復(fù)方“十源白方”提取物的pH值范圍4. 5-6. 5，經(jīng)過薄層層析試驗(yàn)， 主要成分有揮發(fā)油、黃酮、多糖、苷類。有益成份描述一.安全性由于本發(fā)明的活性成分是添加到直接涂抹于皮膚的化妝品之中，對(duì)皮膚的刺激性 如何至關(guān)重要。特委托上海醫(yī)藥工業(yè)研究院實(shí)施了多次皮膚刺激試驗(yàn)。I、材料和對(duì)象材料中藥復(fù)方“十源白方”提取物原液對(duì)象豚鼠(雌/雄)，體重250g 300g使用許可證號(hào)SYXK(滬)2004-0015生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(滬)2004-0007試驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)室溫度20 24°C，相對(duì)濕度60 70%II、方法參照衛(wèi)生部監(jiān)督局頒布的《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》(2007)III、結(jié)果報(bào)告詳見圖2，結(jié)果顯示經(jīng)過14天的試驗(yàn)，刺激反應(yīng)積分為0，表明中草藥提取復(fù) 合物對(duì)皮膚無刺激。二.有效性為了驗(yàn)證本發(fā)明的中藥復(fù)方“十源白方”提取物具有美白皮膚的功效，實(shí)施了以下 的實(shí)驗(yàn)1.抑制絡(luò)氨酸酶活性實(shí)驗(yàn)材料與方法1. 1實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備中藥復(fù)方“十源白方”提取物(自制)；pH = 6.8磷酸緩沖溶液、氫氧化 鈉(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；酪氨酸酶，Tyrosinase EC 1. 14. 18. 19 (Sigma)； L-DOPA (AcrosOrganics) ；AB204-E電子分析天平(METTLE公司)；UV-1601紫外分光光度計(jì) 日本島津公司)等。1. 2中藥復(fù)方“十源白方”提取物對(duì)酪氨酸酶的抑制作用酪氨酸轉(zhuǎn)化成黑色素的過程中，酪氨酸酶的催化作用主要發(fā)生在酪氨酸轉(zhuǎn)化為多 巴以及多巴轉(zhuǎn)化成多巴醌的過程中，多巴醌是一種有色物質(zhì)，在475nm有吸收，可利用分光 光度計(jì)測定含量。本實(shí)驗(yàn)L-D0PA為底物，測定十源白的酪氨酸酶抑制活性。
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表1待測樣品的組成(ml) 按照表1所示，精確吸取十源白提取液、PBS(pH = 6. 8)溶液和0. 15%的多巴溶 液，充分混合均勻，在30°C水浴孵育lOmin后，加入300u/ml的酪氨酸酶溶液，繼續(xù)孵育 lOmin,立即在475nm測定其吸光值。酪氨酸酶抑制率(I)的計(jì)算公式如下I = [ (A-B) - (C-D) ] / [A-B] X 100 %A 未加中藥樣品的加酶混合液所測的吸光度A(A)；B 未加中藥樣品亦未加酶的混合液所測的吸光度A(B)；C 加中藥樣品和酶的混合液所測的吸光度A(C)；D 加中藥樣品而未加酶的混合液所測的吸光度A(D)。結(jié)果與討論將中藥復(fù)方“十源白方”提取物樣品用PBS分別稀釋到5 %，10 %，15 %，20 %， 25%,檢測各個(gè)濃度抑制酪氨酸酶活性。結(jié)果見圖3。從圖3中可以看出中藥復(fù)方“十源白方”提取物濃度在5-20%的時(shí)候，十源白樣品 抑制酪氨酸酶活性與劑量成正比增長，抑制率曲線是y = 102. 01x+42. 245，R2 = 0. 9908。 當(dāng)十源白濃度達(dá)到20%時(shí)，酪氨酸酶抑制率可以達(dá)到62. 2%。2.清除自由基能力實(shí)驗(yàn)1.材料與方法1. 1實(shí)驗(yàn)材料和儀器中藥復(fù)方“十源白方”提取物(自制)；95%乙醇(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)； DPPH(日本東京化成株式會(huì)社，分析純)；AB204-E電子分析天平(METTLE公司)；UV-1601 紫外分光光度計(jì)(日本島津公司)。1. 2中藥復(fù)方“十源白方”提取物對(duì)DPPH的清除作用DPPH的分光光度發(fā)測定原理是依據(jù)DPPH在無水乙醇和乙醇-水體系中呈現(xiàn)深紫 色，分別在517nm和525nm下有最大吸收。自由基清除劑能夠使紫色逐漸退卻，根據(jù)吸光度 的變化測定出DPPH的含量，反應(yīng)自由基清除劑對(duì)DPPH的清除能力。精密稱取DPPH 3. OOmg,用95 %的乙醇溶解并定容至lOOmL，DPPH的濃度為30mg/ L，取4mLDPPH標(biāo)準(zhǔn)溶液，放置在試管中，加入lmL提取物溶液，放置30min后，在517nm測定 吸光度A。根據(jù)下列公式測定DPPH清除率DPPH 的清除率=[l-(Ai-Aj)/Ac] X 100%Ai 提取液+4mLDPPH溶液的吸光度Aj 提取液+4mL95%乙醇的吸光度Ac lmL95 %乙醇+4mLDPPH溶液的吸光度結(jié)果與討論
對(duì)DPPH清除能力以清除率表示，清除率越高，說明抗氧化能力也就越強(qiáng)。將中藥 復(fù)方“十源白方”提取物樣品用95 %乙醇分別稀釋到5 %，10 %，15 %，20 %，25 %，檢測各個(gè) 濃度清除DPPH能力。結(jié)果見圖4。從圖4可以看出，中藥復(fù)方“十源白方”提取物對(duì)DPPH都具有清除作用，并且隨濃 度增加清除率逐漸增高，濃度達(dá)到15%之后趨于平緩，清除率達(dá)到85%。3.抑制黑色素瘤生長速度實(shí)驗(yàn)1.材料和方法1. 1細(xì)胞株及來源人A375黑素瘤細(xì)胞株由北京協(xié)和細(xì)胞資源中心提供。1.2主要試劑及儀器中藥復(fù)方“十源白方”提取物(自制)；甲基噻唑基四唑(Methyl ThiazolylTetrazolium, MTT)為美國Biomol公司產(chǎn)品；DMEM高糖培養(yǎng)基為美國GIBC0產(chǎn) 品，批號(hào)=1345538 ；胎牛血清為美國GIBC0產(chǎn)品，批號(hào)=619559 ；左旋多巴(L-D0PA)、二甲基 亞砜(DMSO) (Sigma 公司)；；TritonX-100 (Sigma 公司)；BB16 型 C02 培養(yǎng)箱，德國 Heraeus 公司；550型酶標(biāo)儀，美國Bio-Rad公司；5417C/R型高速冷凍離心機(jī)，德國Eppondorf公司； 0LYMPUS-CK光學(xué)顯微鏡，日本OLYMPUS公司。1. 3 方法1. 3. 1人A375黑素瘤細(xì)胞的培養(yǎng)無菌條件下細(xì)胞接種于含10%胎牛血清的DMEM 高糖培養(yǎng)基中，37°C、5% C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；待細(xì)胞生長至鋪滿培養(yǎng)瓶85%以上時(shí)，用 0. 25%胰酶消化傳代1次。1. 3. 2細(xì)胞增殖的測定采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)取生長狀態(tài)良好的 細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)細(xì)胞濃度為4 X 105個(gè)/mL，接種于96孔板，每孔190 yl。在37°C，5 % C02 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，棄去上清液，分別加入十源白提取物，每孔10iU，使其終濃度分別為 4、2、1、0. 5,0. 25,0. 125,0. 063g生藥/mL，空白對(duì)照組只加等量溶酶，繼續(xù)培養(yǎng)48h，每孔加 入MTT液20 ill (5mg/mL)再培養(yǎng)4h ；棄去上清液，每孔加入二甲基亞砜(DMS0) 150 u 1振蕩 lOmin左右，570nm波長處測定吸光度。每一濃度設(shè)8個(gè)復(fù)孔。1. 3. 3酪氨酸酶的活性測定同上細(xì)胞培養(yǎng)方法和分組原則，細(xì)胞濃度為IX 105個(gè)/mL。培養(yǎng)48h后，用0. 01M、 pH72的PBS洗滌2次，每孔加入Triton X-100溶50 yl，迅速置-80°C凍存30min，隨 后室溫融化使細(xì)胞完全破裂后加入1 % L-D0PA溶液10 ill于37 °C恒溫反應(yīng)2h，于酶標(biāo)儀 490nm波長處測定A值。每一濃度設(shè)6個(gè)復(fù)孔，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次取平均值。酪氨酸酶活性抑制 率(％ ) = (1-加藥組 A490nm/空白組 A490nm) X100%。1. 3. 4黑素含量的測定取對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液，將細(xì)胞濃度調(diào)為4 X104/mL接種于12孔培養(yǎng) 板，每孔1. 9mL。37V,5% C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，棄去上清液，分別加入中藥復(fù)方“十源白 方”提取物，每孔100 u 1，使其終濃度分別為4、2、1、0. 5、0. 25、0. 125、0. 063g生藥/mL,空白 對(duì)照組只加等量溶酶，繼續(xù)培養(yǎng)48h，棄上清液，PBS洗滌2次，0. 25 %胰酶消化5 8min，將 細(xì)胞收集入 Eppindorf 管，lOOOrpm 離心 lOmin，棄上清，加入 lmol/L Na0H(100u 1)至 37°C 水浴lh，加入400 ill雙蒸水稀釋充分混勻后，每孔100 ill加至96孔板中于酶標(biāo)儀475nm
7波長處測定A值。每一濃度設(shè)6個(gè)復(fù)孔。1. 3. 5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值士標(biāo)準(zhǔn)差(士 s)表示，組間差異采用t檢驗(yàn)。2.結(jié)果2. 1中藥復(fù)方“十源白方”提取物對(duì)A375細(xì)胞增殖的影響顯微鏡下可見正常對(duì)照組細(xì)胞生長狀態(tài)良好，細(xì)胞數(shù)量較鋪板下明顯增多，給藥 組細(xì)胞形態(tài)不整，高劑量組細(xì)胞有明顯破碎與死亡，培養(yǎng)液中有大量細(xì)胞碎片。隨著劑量 的降低，細(xì)胞受損程度逐漸減輕，至0. 125g/mL時(shí)，細(xì)胞形態(tài)與正常對(duì)照組基本無明顯差別 (見附圖5)。從表1、圖5可見，十源白組在4 0. 5g/mL劑量時(shí)，對(duì)A375細(xì)胞增殖有明顯的 抑制作用，與空白對(duì)照組比較，有顯著性差義(P<0.01)；隨著濃度的降低，抑制率逐漸下 降，0. 25 0. 0625g/mL劑量時(shí)，與空白對(duì)照組比較，差異不明顯(P > 0. 05)，顯示出較好的 量_效關(guān)系，其中，最大抑制率為高達(dá)74. 29%。表1中藥復(fù)方“十源白方”提取物對(duì)A375人黑素瘤細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響(士s，n =8) 注與空白對(duì)照組比較，0.01.2. 2中藥復(fù)方“十源白方”提取物對(duì)A375細(xì)胞酪氨酸酶活性的影響從表2、圖6可見，中藥復(fù)方“十源白方”提取物在4 0. 25g生藥/mL劑量下對(duì)酪 氨酸酶活性均有明顯抑制作用(P <0.05或P< 0.01)，但量-效關(guān)系不甚明顯；0. 125g生 藥/mL及以下劑量未能顯示出較好的抑制酪氨酸酶活性作用(P > 0. 05)。表2十源白對(duì)A375人黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶活性的影響(士 s，n = 6) 注與空白對(duì)照組比較，*P<0. 05,**P<0. 01.以上的實(shí)驗(yàn)證明中藥復(fù)方“十源白方”提取物具有很好的抑制絡(luò)氨酸酶活性的作用以及顯著的清除自由基能力，同時(shí)可抑制黑素細(xì)胞增殖，降低酪氨酸酶活性，最終減少黑 素合成，這可能是其具有美白作用的機(jī)制之一。為了進(jìn)一步驗(yàn)證中藥復(fù)方“十源白方”提取物美白皮膚、淡化色斑的作用，配制了 含中藥復(fù)方“十源白方”提取物的美白護(hù)膚霜(配方見配方實(shí)施例4)進(jìn)行了人體實(shí)驗(yàn)含中藥復(fù)方“十源白方”提取物的美白護(hù)膚霜美白測試報(bào)告實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟捎萌梭w試用后根據(jù)皮膚的光澤和顏色等方面的變化自主評(píng)價(jià)結(jié)合皮 膚黑色素測試儀Mexameter MX18定期測試的方法，從兩方面評(píng)價(jià)含中藥復(fù)方“十源白方”提 取物的美白霜的美白效果。黑色素測試原理人類皮膚的顏色主要取決于人體皮膚中黑色素和血紅素(紅色 素)的含量，皮膚黑色素測試儀Mexameter MX18是基于光譜吸收的原理，通過測定特定波 長的光照在人體皮膚上的反射量來確定皮膚中黑色素和血紅素的含量。儀器探頭的發(fā)射器 發(fā)出波長分別為568nm、660nm和880nm三種波長的光照射在皮膚表面，接受器測得皮膚反 射的光。由于發(fā)射光的量是一定的，因此就可以測出被皮膚吸收的光的量，從而測出皮膚黑 色素和血紅素的含量。每種光之間的最大比率是1 5，測量范圍為0999，測量數(shù)值越高， 說明皮膚中黑色素和血紅素的含量越高，皮膚越黑，反之則越白。試驗(yàn)方法選取皮膚較黑或長斑的人為志愿者，試驗(yàn)前先用洗面奶清洗面部，在溫 度20士2°C，濕度40% 60%的環(huán)境中靜坐半小時(shí)后用黑色素測試儀(MX18)測試其雙頰皮膚 黑色素含量，測試值作為空白值，在試用樣品后第10、20、30天測試其雙頰黑色素含量，根 據(jù)試用樣品前后測試結(jié)果，比較樣品的美白效果。樣品使用方法每天早晚潔面后均勻涂抹于面部，避免陽光暴曬，使用期限為20天。試用人群14名健康女性，年齡在30-55歲，膚色較黑，某些受試者有色斑。采用 雙頰測試，數(shù)據(jù)處理及分析1、樣品試用后個(gè)人評(píng)價(jià)有5人覺得皮膚變白了，其中有4人覺得皮膚變化比較明 顯，胎上的膚色變均勻了，斑也變淺了。保濕性良好，未見皮膚不良反應(yīng)。2、黑色素測試值(平均值士標(biāo)準(zhǔn)差SD)及其變化率 3、結(jié)果分析1)從圖7中看到，試用前10天黑色素降低速度最快，10個(gè)志愿者中有8個(gè)黑色素 含量都有明顯降低，志愿者普遍反應(yīng)皮膚明顯變白。2)從圖8中看到，20天時(shí)黑色素降低也比較大，但相對(duì)前10天稍慢一點(diǎn)，10個(gè)志 愿者中有6個(gè)黑色素含量明顯降低，3個(gè)變化不明顯，1個(gè)黑色素含量稍有升高。志愿者普 遍反應(yīng)比10天時(shí)更白了一點(diǎn)。人體實(shí)驗(yàn)證明，含中藥復(fù)方“十源白方”提取物的美白護(hù)膚霜具有快速的、較顯著 美白面部皮膚的效果，特別是對(duì)局部斑點(diǎn)處有明顯的淡化色素的作用。


圖(1)“十源白方”提取液提取工藝圖⑵多次皮膚刺激試驗(yàn)報(bào)告圖(3)十源白方提取液對(duì)酪氨酸酶活性的抑制作用圖⑷十源白方提取液對(duì)DPPH的清除作用圖(5)十源白方提取液對(duì)A375人黑素瘤細(xì)胞細(xì)胞增殖的影響圖(6)十源白方提取液對(duì)A375人黑素瘤細(xì)胞酪氨酸酶活性的影響圖(7)使用含十源白方提取液的美白護(hù)膚霜前后皮膚的黑色素含量圖(8)使用含十源白方提取液的美白護(hù)膚霜后皮膚黑色素含量的變化
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1稱取白茯苓30g和冬瓜籽45g，粉碎，水提取三次。第一次用900g水，提取2h;第 二次750g水，提取1. 5h ；第三次600g水，提取lh。合并提取液，過濾，D101大孔樹脂上樣， 收集0-30襯％乙醇洗脫液，濃縮相對(duì)密度至1. 2-1. 3，60°C下真空干燥，蒸干。稱取桑白皮18g、白芍18g、白及9g，白蒺藜9g，白菊花9g、白果18g和生甘草9g，粉 碎，用70襯％乙醇提取三次。第一次用800g溶媒，提取2h ；第二次用800g溶媒，提取1. 5h ； 第三次用800g溶媒，提取lh。合并提取液，回收乙醇，濃縮，過濾，水分散。經(jīng)D101大孔樹 脂用水洗脫后，收集30-70wt%乙醇洗脫液。濃縮相對(duì)密度至1. 2-1. 3，60°C下真空干燥，蒸 干。稱取檀香9g和白術(shù)18g，粉碎，放置到揮發(fā)油提取器中，加160g水，置電熱套中緩 緩加熱至沸騰，保持5小時(shí)，停止加熱，放置片刻，收集揮發(fā)油。取上述粉末和揮發(fā)油，按1 200的比例(重量比)溶于到丙二醇的水溶液中(丙 二醇水=3 7 (重量比))，得到棕色透明溶液。實(shí)施例2稱取白茯苓27g和冬瓜籽40. 5g，粉碎，水提取三次。第一次用750g水，提取4h ； 第二次用750g水，提取3h ；第三次用750g水，提取lh。合并提取液，過濾，D101大孔樹脂 上樣，收集0-30襯％乙醇洗脫液，濃縮相對(duì)密度至1.2-1. 3，60°C下真空干燥，蒸干。稱取桑白皮16. 2g、白芍16. 2g、白及8. lg，白蒺藜8. lg，白菊花8. lg、白果16. 2g 和生甘草8. lg,粉碎，用50wt %乙醇提取三次。第一次用900g溶媒，提取3h ；第二次用900g 溶媒，提取2h ；第三次用800g溶媒，提取1.5h。合并提取液，回收乙醇，濃縮，過濾，水分散。 經(jīng)D101大孔樹脂用水洗脫后，收集30-70wt%乙醇洗脫液。濃縮相對(duì)密度至1. 2-1. 3，60°C 下真空干燥，蒸干。稱取檀香8. lg和白術(shù)16. 2g，粉碎，放置到揮發(fā)油提取器中，加160g水，置電熱套 中緩緩加熱至沸騰，保持5小時(shí)，停止加熱，放置片刻，收集揮發(fā)油。取上述粉末和揮發(fā)油，按1 100(重量比)的比例溶于到丙二醇的水溶液中(丙 二醇水=1 7(重量比))，得到棕色透明溶液。實(shí)施例3稱取白茯苓66g和冬瓜籽99g，粉碎，水提取三次。第一次用1800g水，提取4h ’第二次1800g水，提取3h ；第三次1500g水，提取2h。合并提取液，過濾，D101大孔樹脂上樣， 收集30-70襯％乙醇洗脫液，濃縮相對(duì)密度至1.2-1. 3，80°C下真空干燥，蒸干。稱取桑白皮39. 6g、白芍39.6g、白及19. 8g，白蒺藜19. 8g，白菊花19.8g、白果 39.6g和生甘草19.8g，粉碎，用90襯％乙醇提取三次。第一次用1800g溶媒，提取4h ；第 二次用1600g溶媒，提取3h;第三次用1600g溶媒，提取2h。合并提取液，回收乙醇，濃縮， 過濾，水分散。經(jīng)D101大孔樹脂用水洗脫后，收集30-70wt%醇洗脫液。濃縮相對(duì)密度 1.2-1. 3，80°C下真空干燥，蒸干。稱取檀香19. 8g和白術(shù)39. 6g，粉碎，放置到揮發(fā)油提取器中，加320g水，置電熱套 中緩緩加熱至沸騰，保持6小時(shí)，停止加熱，放置片刻，收集揮發(fā)油。取上述粉末和揮發(fā)油，按1 500的比例(重量比)溶于到丙二醇的水溶液中(丙 二醇水=5 7重量比)，得到棕色透明溶液。
0132]配方實(shí)施例10133]美白潔面乳用量(重量％)0134]中藥復(fù)方“十源白方”提取物1 200135]椰油酰甘氨酸鈉15 450136]椰油酰谷氨酸鈉0 50137]月桂醇聚醚-1磷酸酯0 50138]椰油酰胺丙基甜菜堿2 60139]月桂酰兩性單醋酸鈉2 60140]月桂酸0 20141]硬脂酸0 20142]乙二醇雙硬脂酸酯1 20143]香精適量0144]防腐劑適量0145]丙烯酸酯/C10 30烷基丙烯酉I酯交聯(lián)聚合物0. 1 0. 40146]去離子水加至1000147]配方實(shí)施例20148]美白潤膚水用量(重量％)0149]中藥復(fù)方“十源白方”提取物1 200150]甘油3 50151]1，3 丁二醇3 --50152]乙醇0 100153]透明質(zhì)酸0 0. 010154]VB30 30155]香精適量0156]防腐劑適量0157]PEG-40氫化蓖麻油0. 0]L 0. 20158]去離子水加至1000159]配方實(shí)施例3
110160]美白護(hù)膚乳液用量(重:量％ )0161]中藥復(fù)方“十源白方”提取物1 200162]C14-22烷基醇(和)C12-20烷基葡糖苷1. 5 2. 50163]礦物油1~ 50164]棕櫚酸異辛酯2~ 50165]聚二甲基硅氧烷0 20166]橄欖油1 40167]碳酸二辛酯2~ 60168]甘油3 80169]黃原膠0.1 0.20170]香精適量0171]防腐劑適量0172]去離子水加至1000173]配方實(shí)施例40174]美白護(hù)膚霜用量(重:量％ )0175]中藥復(fù)方“十源白方”提取物1 200176]十六_十八烷基醇(和)十六-十八烷基葡瞎苷2. 5 4. 00177]角鯊?fù)?~ 60178]辛酸/癸酸甘油三酯3 80179]碳酸二辛酯4 80180]澳洲堅(jiān)果油0 30181]乳木果油0 30182]聚二甲基硅氧烷0 20183]十六十八醇0~ 2. 50184]甘油3 100185]黃原膠0.1 0.0186]卡波姆0 0. 20187]VB30 5. 00188]香精適量0189]防腐劑適量0190]去離子水加至1000191]配方實(shí)施例50192]美白護(hù)膚精華液用量(重0193]中藥復(fù)方“十源白方”提取物1 -200194]甘油3 50195]1，3 丁二醇3 ‘ 100196]乙醇0 100197]透明質(zhì)酸0.005 0198]VB31 5
工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明的中藥復(fù)方“十源白方”提取物配伍合理，制備工藝簡單可行，天然來源，對(duì) 皮膚的安全性高，未見不良反應(yīng)，具有明確的美白皮膚、淡化皮膚黑色素的作用。含有本發(fā) 明“十源白”中藥提取物的化妝品也兼?zhèn)淞吮景l(fā)明“十源白”中藥提取物的特性。
權(quán)利要求
一種中藥提取復(fù)合物，包含下列組分為原料制備而成冬瓜籽，白蒺藜，桑白皮，檀香，白菊花，白果，白芍，白及，白茯苓，白術(shù)和生甘草，其中各組分的重量百分比為21.09-25.78％、4.22-5.16％、8.44-10.03％、4.22-5.16％、4.22-5.16％、8.44-10.03％、8.44-10.03％、4.22-5.16％、14.06-17.19％、8.44-10.03％、4.22-5.16％。
2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合物的制備方法，其特征在于(1)稱取檀香和白術(shù)兩味中藥，粉碎，放置到揮發(fā)油提取器中，加5-15倍重量的水，置 電熱套中緩緩加熱至沸騰，保持5小時(shí)，停止加熱放置片刻，收集揮發(fā)油(1)；(2)稱取白茯苓和冬瓜籽，粉碎，用5-15倍重量的水提取三次，第一次用2-4小時(shí)，第二 次用1.5-3小時(shí)，第三次用一小時(shí)，合并提取液，過濾經(jīng)D101大孔樹脂上樣后，用30-70wt% 乙醇洗脫，合并洗脫液并濃縮，60-80°C下真空干燥，蒸干，得到有效成分(2)；(3)稱取桑白皮、白芍、白及、白蒺藜、白菊花、白果和生甘草，粉碎，用50-90wt%乙醇 溶液提取三次，第一次用7-15倍重量的溶媒提取2-4小時(shí)，第二次用7-15倍重量的溶媒提 取1. 5-3小時(shí)，第三次用7-15倍重量的溶媒提取1-2小時(shí)，合并濃縮液，回收乙醇，濃縮、過 濾、水分散后，經(jīng)D101大孔樹脂用水洗脫后，收集15-70wt%乙醇洗脫液，60-80°C下真空干 燥，蒸干，得到有效成分(3)；(4)取適量揮發(fā)油(1)、有效成分(2)、有效成分(3)，按1 50 1 300 (重量比) 的比例溶于丙二醇的水溶液中(丙二醇水=1 7-5 7(重量比))，得到棕色的透明至 半透明液體，其PH值范圍為4. 5-6. 5。
3.如權(quán)利要求1所述的中藥復(fù)合物在制備美白角蛋白物質(zhì)的組合物中的用途。
4.一種化妝品組合物，其特征在于含有如權(quán)利要求1所述的中藥提取復(fù)合物。
5.如權(quán)利要求4所述的化妝品組合物，其中藥提取復(fù)合物為1_20%，基于化妝品組合 物的總重量。
6.如權(quán)利要求4所述的化妝品組合物，其為潔面乳、護(hù)膚水、護(hù)膚乳液、護(hù)膚霜、護(hù)膚精 華液、護(hù)手霜、沐浴露。
7.如權(quán)利要求4所述的化妝品組合物，其為凝膠、乳液、膏霜、水劑、洗劑。
8.如權(quán)利要求4所述的化妝品組合物，其還可以含其他的有益成份抗氧化劑、保濕 劑、乳化劑、潤膚劑、增稠劑、維生素、表面活性劑、芳香劑、防腐劑、中和劑以及它們的混合 物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新穎的中藥復(fù)方“十源白方”提取物及含有所述活性成分的化妝品。所述的“十源白方”包含冬瓜籽，白蒺藜，桑白皮，檀香，白菊花，白果，白芍，白及，白茯苓，白術(shù)和生甘草等十一味中藥，具有抗氧化，抗黑色素生成的功效，可用于制備美白潔面乳，美白護(hù)膚水，美白護(hù)膚乳液，美白護(hù)膚霜，美白護(hù)膚精華液，美白沐浴露，美白護(hù)手霜。本發(fā)明的中藥復(fù)方不良反應(yīng)少，對(duì)皮膚的安全性高。含本發(fā)明“十源白方”的化妝品具有美白，抗衰老的功效。
文檔編號(hào)A61Q19/02GK101849899SQ200910260069
公開日2010年10月6日 申請日期2009年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月24日
發(fā)明者俞鵬勇, 劉勇, 周潔, 趙保勝 申請人:上海原尚草化妝品有限公司